Prostat kanserinin kesin tanısı biopsi ile konur. Bu işlem günümüzde genellikle yine rektal (barsağın son kısmı) yoldan,  özel bir iğne ile parçalar alınarak yapılmaktadır. Bu parçalar bir patolog tarafından mikroskop altında değerlendirilip, kanser hücreleri araştırılır. Bu işlem sırasında ayrıca, kanser hücrelerinin   yapısı da incelenip derecelendirilir. Bu derecelendirme yöntemine, Gleason skor sistemi denir ve bunun sayesinde kanserin saldırganlığı ölçülüp, tedaviler buna göre düzenlenir.